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  • 病理實驗

    日期:2018-07-20 15:46:54來源:上海唯問生物技術有限公司瀏覽次數:335次

    1. HE染色:

    H&E染色

    材料:石蠟切片

    染料:蘇木精染液為堿性,主要使細胞核內的染色質與胞質內的核糖體著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。

    應用:一般的組織變化和組織產物都可以通過這一染色法顯示出來,是形態學最常用的染色方法。

    結果:細胞核被蘇木精染成鮮明的藍色,軟骨基質、鈣鹽顆粒呈深藍色,粘液呈灰藍色。細胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。


    2. 甲苯胺藍染色:

    甲苯胺藍染色

    材料:石蠟切片,細胞爬片

    染料:甲苯胺藍,人工合成的堿性染料,組織細胞中酸性物質與其中陽離子相結合而被染色

    應用:尖銳濕疣的初篩及肥大細胞的檢測,細胞內酸性黏液多糖染色,神經細胞尼氏小體染色

    結果:可染細胞核呈藍色,肥大細胞胞質內肝素和組織胺等異色性物質可呈易染性紫紅色,軟骨、成骨細胞呈紫紅色,酸性黏多糖呈紅色,尼氏小體呈深藍色。


    3. 天狼星紅苦味酸染色

    天狼星紅染色

    材料:4%甲醛固定組織石蠟切片

    染料:天狼星紅-飽和苦味酸液

    應用:利用膠原蛋白聚合及其纏繞螺旋排列不同的特點,該染色法可在偏振光顯微鏡下,根據雙折光性和著色的不同,分別顯示出四型膠原纖維。

    結果:普通光鏡:膠原纖維呈紅色,細胞核呈綠色,其他成分呈黃色。

    ? ? ? ? ?偏振光顯微鏡:Ⅰ型膠原纖維:紅色或黃色,排列緊密,具強雙折光性;

    ? ? ? ? ?Ⅱ型膠原纖維:多種色彩,疏松網狀、弱雙折光性;

    ? ? ? ? ?Ⅲ型膠原纖維:綠色,細纖維、弱雙折光性;

    ? ? ? ? ?Ⅳ型膠原纖維:淡黃色、弱雙折光性。


    4. TUNEL染色

    TUNEL熒光染色

    材料:石蠟包埋、冰凍和超薄切片,細胞

    染料:熒光素標記的dUTP在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT酶)的作用下,可以連接到凋亡細胞中斷裂DNA的3’-OH末端,并與連接辣根過氧化物酶(HRP)的熒光素抗體特異性結合,后者又與HRP底物二氨基聯苯胺(DAB)反應產生很強的顏色反應。

    應用及結果:單細胞水平上的凋亡原位檢測,抗腫瘤藥的藥效評價及通過雙色法確定細胞死亡類型和分化階段。凋亡細胞核染色呈深棕色,正常或正在增殖細胞不被染色。


    5. 免疫染色

    免疫細胞化學

    包括免疫組織化學(IHC)/免疫細胞化學(ICC)和免疫熒光(IF),均是通過可視化抗原抗體結合反應,對組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)定性、定位和相對定量的研究。IHC和ICC使用的顯色劑多為酶,即化學顯色;IF使用的顯色劑多為熒光素,即熒光顯色。

    材料:細胞、冰凍切片、石蠟切片

    應用:惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷,轉移性惡性腫瘤的原發部位確認,腫瘤的病理分型,微小轉移灶確認,陽性產物定位、相對定量,細胞凋亡檢測。

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